精确的菌落计数和细菌病原体鉴定是当今临床和微生物学研究的基础。涉及细菌等微生物的研究通常需要精确的菌落计数,并对病原体进行详细的理论评估。虽然手动细胞计数仍是实验室的典型做法,但由于其结果不稳定且速度慢,因此对高通量程序实施具有挑战性。自动菌落计数在过去十年中受到越来越多的关注,因为它将人工菌落计数过程从繁琐转变为更加可靠和一致。Logos Biosystems 等生物技术领域的领先公司的主要驱动力是紧跟微生物研究的发展,促进研究的进行,确保研究的准确性和可靠性。
Logos Biosystems 的创新设备 QUANTOM Tx™️ 是一种自动荧光染色微生物细胞计数仪,包括自动荧光成像和细菌病原体分析。与耗时的手动计数相比,QUANTOM Tx™️ 可在 30 秒内完成每个样品的快速计数。
人工计数细菌菌落形成单位(CFUs)是微生物研究的标准做法。方法是等分少量的细菌液体培养物,然后将多个连续稀释的菌落培养到装有培养基的培养皿中。在适合被测微生物的条件下进行培养后,对菌落进行计数以获得 CFU 数。虽然人工计数是测量菌落形成单位 CFU 的经典方法,但也可以自动计数。CFU 的主要局限性在于它只能计算可培养的种群。
尽管细菌计数是一项黄金标准,但人工计数既费时又容易出现人为错误,因为初始细菌培养物的稀释度较高,需要计数的菌落较少,仅分析稀释度较高的初始细菌培养物的几率较高,因此,低计数测定中的微小计数错误会对初始细菌液体培养基中的计算浓度产生负面影响。此外,培养皿上的 CFU 数量增加可能会由于细菌过度拥挤而导致欺骗性结果。
另一方面,QUANTOM Tx™️ 通过精确的细胞计数和详细的细菌浓度分析,弥补了人工计数繁琐工作的不足。这款自动荧光染色微生物细胞计数仪可执行活力测量,并能对小至 0.3μm 的细胞进行计数,从而得出准确的微生物细胞数。与手动菌落计数方法相比,QUANTOM Tx™️ 计数范围灵活,可同时捕获多达 10 个视野。此外,QUANTOM Tx 还配备了用于计数存活细菌细胞的专用试剂盒,从而消除了 CFU 技术的可变性和不稳定性。.
有趣的是,QUANTOM Tx™️ 可对多种革兰氏阳性和革兰氏阴性细菌进行计数,包括但不限于:
Gram Negative | Gram Positive |
Alcaligenes Faecalis | Bacillus Coagulans |
Comamonas Terrigena | Bacillus Lentus |
Enterobacter Aerogenes | Bacillus Lichenformis |
Enterobacter Cloacae | Bacillus Mycoides |
Escherichia Coli | Lactobacillus Casei |
Pseudomonas Fluorescens | |
Proteus mirabilis | |
Pseudomonas stutzeri | |
Serratia marcescens |
另一方面,Logos Biosystems 不断测试可使用其自动化机器进行计数的其他微生物。 QUANTOM Tx™️不仅将耗时的手动菌落计数转变为省时的程序,而且还通过其敏感的图像传感器和处理器以及可定制的数据报告提供实时数据分析。
此外,使用流式细胞术定量细菌细胞数量是先前报道的方法。使用特定的荧光染料对悬浮液中的细菌有机体进行分析,这些染料通常能显示细菌细胞的存在并检测其存活率。尽管流式细胞仪是一种快速的方法,但由于它需要昂贵的染料、昂贵的设备和专门的技术人员来操作,这可能会限制流式细胞术的使用。
相反,QUANTOM Tx™️是用户友好的,任何科学家或研究人员都可以在实验室中使用四个简单的步骤顺利操作。首先,通过将细菌样品与QUANTOM Tx™️总细胞染色染料和QUANTOM Tx™️总细胞染色增强剂混合制备微生物细胞悬液,然后加入QUANTOM Tx™️细胞上样缓冲液I,并将等分液上样到QUANTOM Tx™️M50细胞计数载玻片上。样品准备好后,使用QUANTOM Tx™️离心机进行离心。接下来,将载玻片插入QUANTOM Tx™️载玻片端口后进行细菌计数。最后,自动进行数据审核和导出,并显示在屏幕上,报告、图表、成像和稀释计算都可以根据研究人员的偏好执行、保存和打印。
食品和水系统中的微生物检测之所以需要离心,是因为细菌细胞往往悬浮在不同的 Z 位置上。通过将所有细胞离心到一个平面上,我们就可以使用 QUANTOM Tx™️ 捕捉到清晰、聚焦的图像。准确的细胞计数对于根据可靠的数据做出明智的决策,以及在广泛的应用中获得一致且可重复的结果无疑是非常重要的。
最近,几位研究人员回顾了 QUANTOM Tx™️ 在微生物种群定量方面的应用,并将其描述为细菌计数的“绝佳工具”,因为与血球计数法相比,QUANTOM Tx™️ 有效地将他们的实验从耗时变为高效。此外,QUANTOM Tx™️ 还受到研究人员的推荐,因为它“易于操作,即使是初学者也能轻松上手”,这凸显了 Logos Biosystems 为简化研究方案而灌输的用户友好功能。QUANTOM Tx™️ 除了被描述为可靠、准确之外,还因其 “直观的软件和出色的售后服务”而受到传染病研究机构的赞扬。
此外,在最近的一项研究中,QUANTOM Tx™️ 被用于探索由马尾藻合成的碳纳米点-氧化锌(CND-ZnO)纳米复合材料的抗菌效果。研究选择了两株革兰氏阳性菌和三株革兰氏阴性菌来检测 CND-ZnO 的抗菌活性。研究人员利用 QUANTOM Tx™️ 精确的细菌计数能力来帮助确定 CFUs,从而将所有细菌菌株调整到相同的体积。
总之,Logos Biosystems 的 QUANTOM Tx™ 能够自动识别和计数单个细菌细胞。QUANTOM Tx™ 的精密计数算法能够检测单个微生物细胞,无论其排列和形态如何,该过程都是快速和准确的,使其成为首屈一指的细菌计数仪。
使用的参考文献: