手动和自动细胞计数哪个更好？

细胞计数是许多细胞培养实验室工作流程中至关重要的常规部分。通常做法是直接对小体积中的单个细胞计数，以估算大体积中有多少细胞。这对于培养物的维护、建立检测、评估培养物中细胞的健康或活力以及临床或诊断应用都很有用。但是什么时候应该通过让机器为您做这件事来将细胞计数提升到一个新的水平呢？

手动细胞计数

传统的细胞计数方法是在台式显微镜下使用一种带有网格的特殊载玻片（称为血细胞计数器）进行手动计数。研究人员按照标准化程序对单个细胞进行计数，并以此计算出每微升培养物中有多少个细胞。

“此外，还可以通过添加台盼蓝等膜排斥染料来确定活细胞和死细胞的数量，完整的细胞不吸收台盼蓝，而细胞膜受损的不健康细胞会吸收染料，并可在显微镜下识别。”德国达姆施塔特默克公司生命科学业务监控工具全球产品经理 Mahesh Dodla 说。这有助于获得更准确的计数和评估培养物的健康状况，也是自动细胞计数系统中采用的一种技术

自动细胞计数

自动系统一般采用成像法或阻抗法。基于成像的系统使用显微镜和摄像头捕捉图像，然后使用算法对细胞进行计数。而基于阻抗的系统则是通过测量电阻来确定细胞数量。

使用基于图像的原理的细胞计数仪可以进一步分为荧光成像或明场成像。 “基于标记的方法是最常见的，因为它是最可靠的，”安捷伦科技公司全球科学项目经理 Joe Clayton 说。

系统插入样本的方式各不相同；有些系统使用特殊的一次性载玻片，有些系统则可以在试管或微孔板中一次采集许多样本。Logos Biosystems 公司首席执行官 Neon Jung 分享说：”在任何情况下，由机器进行计数都能摒弃’人眼主观、耗时的判断，取而代之的是更加客观、快速和准确的技术'”

自动细胞计数适用于大多数细胞类型，但通常要求细胞悬浮。克雷说：”一个巨大的挑战可能是尺寸的限制，特别是较小的细胞。因此，如果要对非哺乳动物类型的细胞，如细菌或酵母细胞进行计数，就会面临挑战。”

其他会给自动计数仪带来挑战的细胞包括不能很好保留染色剂的细胞，如免疫细胞。最难处理的可能是聚集在一起的细胞，聚集的细胞会给基于图像和阻抗的系统带来挑战。”在这种情况下，能对成团细胞进行精确计数的软件算法对准确性非常重要。”Jung 说。

值得注意的是，有些细胞计数器不仅能计数，还能提供细胞活力、直径、活/死计数、培养物图像和荧光强度等信息。”有些仪器（如 Logos Bio 的 LUNA FL）还能利用荧光信息提供转染效率信息。” Jung 说。

手动细胞计数 VS 自动细胞计数

手动和自动细胞计数之间的主要考虑因素是成本、劳动力和准确性。

就成本而言，手动细胞计数只需要一次性购买几件物品。相反，自动计数仪仅系统成本就要数千到数万美元不等，而且还需要消耗品采购和维护成本。

除了最快和最擅长手工计数的科学家外，自动计数仪比其他计数器都快。但即使是那些手工计数细胞速度很快的科学家，”也要花费大量的时间”。克莱顿指出：”因此，尤其是当你有大量样本时，能够按下开始键、运行并显示结果对人们来说非常有用。

自动化系统准确性的主要优点是它消除了用户之间或实验室之间的差异。 这种重复性对于依赖一定数量的细胞作为输入的测定或方案非常重要。

克莱顿说：”如果细胞数量较少或细胞浓度较低，更大的视野肯定会比传统的手动方法更有优势。”

什么情况下值得购买自动细胞计数仪？

手动和自动细胞计数的主要考虑因素是成本、劳动力和准确性。

克莱顿建议考虑一下系统的使用方式，”这是否是实验室中大多数项目的常规操作？如果答案是肯定的，我认为考虑自动化系统是有意义的。如果实验室只是涉足细胞培养，有人每周去做几次细胞计数，那么可能就没有必要购买细胞计数系统，或者至少没有更复杂的系统。

还值得考虑的是，准确性和可重复性在细胞计数工作流程中的重要性。此外，您还需要考虑是否有一套系统可以帮助您完成工作流程的其他部分。

购买自动细胞计数仪时应考虑的事项

“选择细胞计数仪时首先要考虑的是样品类型和应用。主要使用永生细胞系的实验室不需要荧光细胞计数仪。但在培养原代细胞的实验室中，荧光细胞计数仪是必不可少的。 其次，实验室应考虑一次需要计数的样本数量，看看哪种系统能满足其在处理量方面的需求。”Jung 表示 。

然后，他们还应考虑每个系统的准确性和计数方法，以及系统可能提供的任何附加功能。”我认为另一个非常重要的考虑因素是：是否有可能获得一个具有多种功能的集成系统。因此，它不仅仅是一个专用的细胞计数系统，而是将细胞计数作为其众多功能中的一项，”Clayton 说。

最终，是否购买自动细胞计数仪以及选择哪种计数仪在很大程度上取决于实验室。不仅要认真审视实验室目前的工作，还要考虑实验室的长期需求，这可能会有所帮助。

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