细菌计数的艺术:从 OD600 到使用自动细菌计数器进行单细胞计数
2023-11-20

细菌计数的艺术:从 OD600 到使用自动细菌计数器进行单细胞计数

例如,细菌计数对于了解感染的进展和抗生素的有效性至关重要。 在食品行业,细菌计数可确保产品的安全和质量。监测细菌含量有助于检测和预防由沙门氏菌、大肠杆菌和李斯特菌等病原体引起的食源性疾病。 在生物技术行业,细菌计数是开发抗生素、疫苗和酶等产品的基础。在用于制造酸奶、奶酪和生物燃料等产品的发酵过程中,细菌计数也至关重要。准确的细菌计数可确保这些过程和产品的一致性、效率和安全性。

本博客将讨论四种细菌计数技术: 光学密度 (OD) 600 测量、CFU 菌落计数法、血细胞计数器单细胞计数和 QUANTOM Tx™ 自动单细胞计数。每种方法都以独特的视角观察细菌种群,满足不同的研究需求和精确度要求。

1. 光学密度测定(OD600

了解 OD 600: 这种方法涉及在 600 纳米波长下测量细菌培养物的浊度。这是一种快速、无损的细菌浓度估算方法,其中浊度与细胞数量相关。

优点和局限性: OD 600 因其速度和简单性而受到重视,但在区分活细胞和死细胞方面存在不足,并且在低浓度下效果较差。

2. 菌落计数(CFU): 清晰度培养

CFU 解释: 菌落形成单位 (CFU) 计数是一种传统的微生物学方法,用于测量活的和可培养的细菌细胞的数量。它包括将稀释的细菌样本铺在琼脂板上并让菌落生长。

计数菌落: 培养后,对可见菌落进行计数。每个菌落代表一个或一组已繁殖成可见团块的细菌。

为什么 CFU 计数很重要: CFU 计数对于评估细菌细胞的活力至关重要,因为只有活细胞才能形成菌落。该方法对于评估细菌生长、抗生素有效性和质量控制过程中特别有用。

3. 血细胞计数器: 单细胞级精度

传统工具: 血细胞计数器是一种带有网格的专用显微镜载玻片,用于手动计数细胞。 为了对细菌细胞进行计数,使用腔室深度为 20 微米的血细胞计数器将小细菌细胞收集到同一焦平面中。

缺点: 然而,使用血细胞计数器进行细菌计数,尽管其精度很高,但也有一些明显的缺点。 该方法可能非常耗时且主观,具体取决于使用者的技能和解释。

计数技术: 将稀释后的样本放在网格上,在显微镜下对方格内的细胞进行计数,根据计数的细胞数量和稀释因子计算出原始样本中的浓度。

优点: 这种方法精确度高,尤其适用于特定细胞类型或异质样本。与 SYTO 9 和碘化丙啶(PI)等染料一起使用时,可实现活/死细胞计数。

4. 使用 QUANTOM Tx™ 进行自动细胞计数:先进的技术

创新方法: QUANTOM Tx™ 是一种自动细菌计数设备,可使用荧光标记对单个细菌细胞进行计数。

功能: 它用荧光染料标记细菌,捕获图像并对荧光标记的细胞进行计数。 为了防止细胞计数过程中的布朗运动,标记的细菌细胞集中在单个焦平面上,然后使用能识别荧光的自动化仪器进行计数。

优点: 自动计数器最显着的优点之一是其处理样品的速度比手动计数方法快得多。 这种速度对于临床实验室、研究机构和工业应用等需要在有限时间内分析大量样本的高通量环境至关重要。此外,自动化系统最大限度地减少了人为错误和主观判断带来的可变性。由于计数是由机器完成的,因此无论操作员是谁,结果都是一致的。此功能可确保结果的可重复性和客观性,这对于准确的研究和分析来说至关重要。

结论

从快速评估到深入分析,不同的细菌计数方法共同构成了各个领域细菌定量的支柱。无论是医学研究、食品安全、环境监测还是生物技术创新,掌握这些技术都为理解和利用这些微观实体的力量开辟了一个充满可能性的世界。