使用 Logos Biosystems 进行细胞计数: 多样化、简单化、精确化
2023-01-15

随着当今大多数生物医学研究中对进行多次和连续细胞计数的需求不断增加,获得快速、准确和可靠的细胞计数对于许多研究人员来说至关重要。这种紧迫感是生物技术研究领先公司开发新型高效自动化细胞计数仪的驱动力。

Logos Biosystems 开发了一系列自动细胞计数和成像仪器,以强调精确细胞计数在细胞和分子研究最新进展中的作用。例如 LUNA-II™是一款创新型自动明场细胞计数仪,具有强大的自动聚焦和光线调节功能,可在 15 秒内完成可靠的细胞计数。

Accurate cell counting plays a fundamental role in quantitative cellular research. The 精确的细胞计数在细胞定量研究中起着基础性作用。LUNA-FX7™ 自动细胞计数仪采用精确快速的自动对焦算法,具有双荧光和明场双照明功能,可确保细胞计数的准确性。有趣的是,LUNA-FX7™ 可通过配合使用多通道移液器的载玻片同时计数多达 8 个样品,从而使细胞培养过程更快、更简单。获得精确的细胞计数是在研究实验室中分裂和维持不同培养细胞系的关键。LUNA-FX7™ 内置 QC 软件,用于日常监测和分析获得的数据,以确保质量控制和获得结果的可靠性。此外,这款自动细胞计数仪还具有独特的生物处理功能,可监测、记录和分析不同的生物处理活动,如细胞的生长率和趋势图。

Image shows autofocus, dual fluorescent counting of the LUNA-FX7 using AO/PI staining; living cells (green) and dead cells (red).

然而,确定酵母细胞的密度在食品和饮料行业至关重要,因为发酵酵母的定量会直接影响最终产品的质量和风味。酵母细胞容易结块,这使得其计数过程具有挑战性。Logos Biosystems 的 LUNA-II YF™ 自动酵母细胞计数仪采用自动对焦最佳去簇算法,可在 15 秒内对多个菌株的单个酵母细胞进行高效计数。

在细胞和分子研究中,分辨多孔板中的存活细胞和死亡细胞对于评估细胞疗法的疗效和效力以及为不同恶性肿瘤提出新疗法至关重要。此外,在干细胞衍生研究中,活有核细胞的精确计数至关重要,它为下游实验的质量和精确性奠定了基础。  LUNA-STEM™  和 LUNA-FX7™ 自动荧光细胞计数仪可对组织衍生细胞(如干细胞)和来自脂肪基质血管部分 (SVF)的其他细胞准确计数。它配备了双荧光和明场光学系统,可在红细胞和碎片污染样品中区分活细胞和死细胞。这种自动细胞计数仪将容易出错、耗时的干细胞计数过程转变得可靠且快速,只需 30 秒即可完成计数,并提供有关细胞浓度、细胞活性和平均细胞大小的报告。

手动细胞计数是一种早期的方法,依赖于名为血球计数器的计数板。首先,用 70% 的乙醇清洗血球计数器。然后,在计数室上盖上盖玻片,用吸管吸出少量悬浮细胞,并将其释放到靠近计数室边缘的地方,这些细胞就会通过毛细作用进入计数室。细胞计数由操作员使用调节到 4 倍或 10 倍物镜的显微镜手动进行,每次聚焦于血球计数板上四个方格中的一个,最后取平均值作为细胞计数的总和。 

手动细胞计数可视为细胞计数的廉价替代方法。 在一些实验室,例如那些不经常需要细胞计数或研究方案不需要高精度细胞计数的实验室,可以使用血球计数器。

然而,手动细胞计数容易出现人为错误,使其在高级研究中不太可靠。此外,在定量细胞研究中进行大量细胞计数时,手动计数并不可行,因为它非常耗时。连续数轮计数可能会导致眼睛疲劳,并可能增加人为错误的可能性。 考虑到人工计数不能很好地区分一个悬浮液中的多种细胞类型,这对许多科学家来说是一个挫折,因为这可能会影响他们的结果。

因此,由于自动细胞计数的准确性、时间效率和生产力,近年来许多实验室转向了自动细胞计数。 

当实验室需要频繁的对更多数量的细胞进行计数时,自动细胞计数仪是一种更快、更简单、更精确的替代方法。与血球计数器相比,自动细胞计数仪能区分悬浮液中不同类型的细胞,而不管它们的大小和形状是否相似。例如,Logos Biosystems 的LUNA-FL™是一种双荧光自动细胞计数仪,可区分存活细胞和死亡细胞。此外,它还能对被非细胞碎片污染的培养物中的细胞进行精确计数。 

高通量:LUNA-FX7™ 提供多种载玻片选项,计数体积高达 5.1 µl,从而降低每次计数的误差和 CV值。

自动机器聚焦清晰,光照度可调。LUNA-II™ 自动细胞计数仪采用了一种基于液体透镜机制的新型自动聚焦技术,可实现最佳细胞计数效果。这种新技术在细胞计数时不使用机械运动部件来改变样品的 Z 位置,而是通过在液体透镜上施加一个小电压来自动获得 Z 位置。

多种自动细胞计数和成像机器的设计具有成本效益,例如与所有 LUNA 细胞计数仪系列兼容的可重复使用的计数载玻片,以最大限度地减少浪费和费用。 此外,LUNA 细胞计数仪系列还配有内置热敏打印机和计算机,可捕捉并自动分析可直接打印的高分辨率细胞图像。并且它还包含用于多种细胞系(如人类、猴子、中国仓鼠、鱼、大鼠和小鼠)的默认细胞计数方案。有趣的是,它提供了安装研究人员选择的定制和细胞特定协议的功能。Logos Biosystems 利用这些功能以确保生成准确且可靠的数据,并使自动细胞计数变得简单且多样化。

此外,正确的细胞计数对于量化细胞增殖、测试不同试剂和化合物的细胞毒性非常重要,因为在以细胞活性为标准的生物测定中,这些试剂和化合物可能会导致细胞死亡。LUNA FX7™ 自动细胞计数仪可同时扫描多达 47 个视野,为细菌以外的任何细胞类型提供准确的细胞计数结果。QUANTOM Tx™ 微生物细胞计数仪可同时扫描 20 个视野进行细菌计数。这样就能得到正确的细菌细胞计数结果,从而避免了人工菌落计数的多变性和不可靠性。它内置创新的细菌特异性细胞检测软件,可对培养物中细菌细胞的不同组别、形状、大小和排列方式进行计数和区分。 

由于细胞计数对于不同的细胞系来说可能很困难,因此对于自动细胞计数仪来说,多样性和易用性是一大优势。LUNA-II™ 是一款易于操作的用户友好型机器,可自动对成团细胞进行去簇处理,并以颜色编码区分活细胞和死细胞,从而使细胞计数过程顺利运行。值得注意的是,自动细胞计数可以使用毒性较低的染料(如赤藓红 B (EB))而不是毒性较高的染料(如台盼蓝 (TB))来完成。 此外,它还可以使用未染色的细胞计数技术进行操作。

LUNA-II™’s BF capabilities.

目前,在不同领域的许多研究中,自动细胞计数仪的使用已被确定为规程和程序。在环境领域,一篇综述展示了自动细胞计数的原理,并通过应用荧光方法估算培养微藻的叶绿素完整性,强调了其在微藻管理方面的功能性。有趣的是,这一程序向实现可持续发展目标(SDGs)迈进了一步。在同一领域,LUNA-II™ 被用于估算培养皿中海洋微藻细胞的丰度和活力及其大小。.  

实验和临床医学中的许多研究涉及使用和比较不同类型的细胞和不同的细胞系,以揭示疾病的机制并评估可能的疗法。 LUNA-II™ 自动细胞计数仪用于测定细胞活力,旨在评估源自胰岛素-GLase 细胞系的球体的形态和活力,以更好地了解 2 型糖尿病的潜在细胞机制。

LUNA-II™自动细胞计数仪在农业研究中的应用非常适合评估葡萄花粉粒的活力、花粉粒的平均大小和在使用不同环保植物检疫试剂进行测试处理后的总数。在干细胞研究领域,它不断蓬勃发展,并且在很大程度上依赖于自动化细胞计数仪来获取精确、快速和准确的数据。一项研究在利用三种不同浓度的沃顿果冻培养基,评估成纤维细胞在培养过程中的再生能力,并测试其改善血清缺乏的成纤维细胞的功效。借助 LUNA-II™ 评估成纤维细胞的增殖能力,以避免结果的主观性并避免与手动细胞计数相关的时间消耗。

自动细胞计数仪将乏味的细胞计数过程转变为快速、精细的过程,而且提供更高精度和可靠性的结果。Logos Biosystems 的自动细胞计数仪对于不同研究领域的细胞计数和培养维护程序至关重要。它们易于使用、节省时间、性能卓越并能提供高质量的数据,因此受到许多研究人员的推荐。

参考文献: 

  1. https://logosbio.com.cn/luna-ll/
  2. https://logosbio.com.cn/luna-fx7/
  3. https://logosbio.com.cn/luna-ll-yf/
  4. https://logosbio.com.cn/luna-stem/
  5. https://logosbio.com.cn/luna-fl/
  6. https://www.ncbi.nlm.nih.gov/books/NBK144065/
  7. https://logosbio.com.cn/quantom-tx/ 
  8. https://www.mdpi.com/1996-1073/13/22/6019
  9. https://msoe.ru/en/articles/2020/41-11/
  10. https://dergipark.org.tr/en/pub/omujecm/issue/62209/902196
  11. https://www.natsci.upit.ro/media/2161/056vizitiu-et-al.pdf
  12. https://iopscience.iop.org/article/10.1088/1742-6596/884/1/012067/pdf